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食品安全问题

霉变谷物中毒

黄曲霉毒素B1检测试纸卡使用说明书
方法编号:CDC-5512

1.适用范围与检测意义: 本品适用于谷物、饲料、食用油、调料和发酵酒等物质中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1简写为AFB1)的快速检测。黄曲霉毒素B1是目前已知的化学物质中致癌性很强的一种,对人和若干动物具有强烈的毒性,其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。

2.测定原理: 本品采用高度特异性抗体抗原反应及免疫层析分析技术,通过单克隆抗体竞争结合AFB1-BSA偶联物和样品中可能含有的AFB1的原理。试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的AFB1-BSA偶联物和被胶体金标记的抗AFB1单克隆抗体。检出限为5ng/ml。

3.所用器皿: 常量天平±0.1g;蒸发皿或烧杯;量筒;滴管;移液管;小型粉碎机;离心机等。

4.样品制备
4.1谷物与饲料: 取5g以上有代表性样品并充分粉碎,准确称取2.0g均匀试样于15ml离心管中,向离心管中准确加入2ml纯净水和8.0ml的乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡5min,4000rpm离心1分钟,将上清液用吸管吸出2.0ml到小玻璃杯中,用电吹风吹干液体,根据不同样品对黄曲霉毒素B1(AFB1)的限量标准要求不同,参考下表将不同体积的稀释液加入到已吹干的杯子中,用吸管反复冲洗杯底和杯壁,使残渣彻底溶解,此溶解液即为样品检测液。

谷物中AFB1限量(ppb) 5 10 20 30 40 50 100
使用稀释液体积(ml) 0.4 0.8 1.6 2.4 3.2
稀释液滴瓶滴数(滴) 8 16 32 48 64 80 160

4.2食用油: 称取2.0g油样于小烧杯中,用8ml正己烷分次将试样转移至分液漏斗中,准确加入4ml纯净水充分振荡3min,吸去上层正己烷层,再加入4ml的乙酸乙酯,将瓶塞盖紧密封,充分振荡5min,静置或离心得上清液,将上清液吸出2ml到小玻璃杯中,用电吹风吹干,参照表格,根据AFB1限量,量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液

食用油中AFB1限量(ppb) 5 10 20 30 40 50 100
使用稀释液体积(ml) 0.6 1.2 2.4 3.6 4.8 6.0 12.0
稀释液滴瓶滴数(滴) 8 16 32 48 64 80 160

4.3酱油、醋: 准确量取2.0ml样品于15ml离心管中,准确加入4.0ml乙酸乙脂,塞紧瓶塞后充分震荡5min,静置1~2min,待溶液分层以后将上清夜用移液枪(或移液管,吸管)全部转移到另一只15ml离心管中,加入2.0ml 0.05M Na2CO3溶液,充分震荡3min,用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中,吹干滤液,参照表格,根据AFB1限量,量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

酱油、醋中AFB1限量(ppb) 5 10 20 30 40 50 100
使用稀释液体积(ml) 1.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10 20
稀释液滴瓶滴数(滴) 20 40 80 120 160 200 400

4.3发酵酒: 准确量取2.0ml样品于15ml离心管中,准确加入4.0ml乙酸乙脂,塞紧瓶塞后充分震荡5min,静置1~2min,待溶液分层以后用吸管取2mL上清液到小玻璃杯中,吹干滤液,参照食用油样品制备表格,根据AFB1限量,量取相应体积稀释液复溶杯底固体。此溶解液即为检测液。

5测定
5.1 使用前将试纸卡和待检样本溶液恢复至室温。
5.2 从原包装袋中取出试纸卡,打开后平放在桌面上,在1小时内尽快地使用。
5.3 用滴管吸取待检样品溶液,滴加3滴于加样孔中,加样后开始计时。
5.4 结果应在5min时读取,超过10min的时间判读无效。

6结果判定
6.1阳性:C线显色,T线不显色,判为阳性。
6.2阴性:C线显色,T线肉眼可见,无论颜色深浅均判为阴性。
6.3无效:C线不显色,无论T线是否显色,该试纸均判为无效。

7说明
7.1本品为一次性产品,勿重复使用。
7.2如遇稀释液不足,可用蒸馏水加入稀释液中混匀后使用。
7.3本品为筛选方法,任何阳性结果请用其它方法作进一步确认。
7.4有条件的实验室可以用AFB1标准品作为判断参考。
7.5本品应保存在干燥阴凉处(4-30℃),有效期18个月。

8包装: 试纸卡5片,稀释液1瓶,15ml离心管1支。

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